1.1 采血计划审批

猕猴血液样本的采集需要制定采血计划，经实验动物福利伦理相关机构或部门审批通过后方可进行，保证采血计划符合采血操作的可行性、采血量的合理性、血液使用的必要性要求，严禁无审批操作。

1.2 动物准备

状态检查：采血前24小时检查猕猴的精神状态、饮食、排便情况，确认无发热、腹泻、皮肤破损、血管异常等情况，不合格动物暂停采血，待状态恢复后再执行。

保定/麻醉：根据采血部位选择合适的保定/麻醉方式，颈静脉采血需麻醉或深度镇静，股静脉、头静脉、隐静脉可轻度麻醉或仅物理保定。麻醉药物剂量需按动物体重精准计算，由专业人员操作，确保麻醉效果及动物安全并全程监测其生命体征直至顺利苏醒。

动物标识：确认动物编号，做好标记，避免混淆样本。

1.3 器材准备

准备一次性采血针、真空采血管、样本收集管、无菌棉球、碘伏消毒液、75%酒精、止血带、无菌纱布、低温运输箱、动物记录单及样本标签、离心机、生物安全废物袋、利器盒等。

1.4 人员防护

操作人员需穿戴防护服、无菌手套、防护眼镜、口罩及鞋套。

2.1 通用操作步骤

固定与备皮：将保定/麻醉后的猕猴按采血部位要求摆放体位，用固定架固定肢体，充分暴露采血部位；剃毛刀剃除采血部位的毛发（备皮），避免毛发污染采血区域，备皮时动作轻柔，避免损伤皮肤。

抽血前将猴固定，固定好后，将抽血部位的毛剪去，用75%酒精棉球擦拭采血部位皮肤，擦拭范围直径≥5cm，由内向外螺旋式擦拭，重复2–3次，每次擦拭后更换新的棉球；消毒后待酒精完全自然干燥（约30秒），严禁未干时穿刺，避免酒精进入血管导致溶血。

真空采血管采集：采血者通过按压方式，确定静脉血管走向及位置，一只手固定动物采血位置，另一只手用一次性采血针斜面朝上以约30度角从血管外侧皮肤刺入，缓慢推进，当采血针后端管道首次出现血液时，可将针头再次轻轻往前推进1-2mm，以保证针头顺利扎进血管内部，此时将采血针另一头刺进真空采血管进行血液采集。

血液采集足够后，迅速退出采血针针头，并利用无菌棉球以适宜的力度进行按压止血，直至采血位置不再出血，解除猴的固定状态。

注射器采血采集：选择合适针头的一次性注射器，按照利用真空采血管采集的方式，固定猴并找准血管。用注射器抽血时，至少需要两人一起操作，一人固定动物，一人缓慢进行血液的抽取，采集结束后，同样利用无菌棉球以适宜的力度按压止血，直至采血位置不再出血。

术后护理：将动物转移至复苏区，观察至完全清醒，期间注意保暖、补水；清醒后放回饲养笼，护理人员在24小时内定期观察动物的精神状态、饮食、采血部位有无异常，做好护理记录。

2.2 不同采血部位专项操作要点

1、股静脉采血（最常用，适合大/中量采血，单次5–50mL）

体位：动物仰卧，后肢外展、伸直，充分暴露股三角区域（大腿根部）。

定位：用手指触诊股动脉搏动，股静脉位于股动脉内侧0.5—1cm处，血管较粗，易定位。

穿刺：选用23–25G针头，与皮肤呈30—60°角进针，进针深度根据动物体型调整（一般0.5–1cm），轻负压抽吸，见回血后固定针头，缓慢采血。

注意：必须在麻醉或深度镇静下操作，避免动物挣扎损伤血管；穿刺时避免误刺股动脉，若刺中动脉，立即加大按压力度，延长按压时间（≥1分钟）。

2、头静脉采血（前肢，适合中小量采血，单次1–10mL）

体位：动物侧卧或仰卧，前肢伸直，在肘关节上方1–2cm处扎止血带，使头静脉充盈（可见皮下蓝色血管）。

定位：前臂背侧皮下，可见清晰的蓝色血管，避开皮肤破损、结节部位。

穿刺：选用23–25G针头，与皮肤呈20–30°角进针，斜面朝上，轻负压抽吸，见回血后固定，缓慢采血；采血过程中可轻揉血管周围，促进血液流出。

注意：止血带绑扎时间不宜过长（≤5分钟），避免血管损伤；可轻度镇静或仅固定动物，减少挣扎。

3、隐静脉采血（后肢，适合中小量采血，单次1–10mL）

体位：动物侧卧，后肢伸直，在膝关节上方1–2cm处扎止血带，使隐静脉充盈。

定位：后肢内侧，膝关节下方，皮下可见蓝色血管，血管较细，需仔细定位。

穿刺：操作同头静脉，选用23–25G针头，20–30°角进针，轻负压抽吸，避免反复穿刺。

注意：血管较细，采血速度不宜过快，避免血管塌陷；止血带力度适中，避免压迫过紧导致皮肤损伤。

4、颈静脉采血（大量/紧急采血，单次20–80mL）

体位：动物仰卧，头部固定，颈部伸直，暴露颈静脉沟（颈部两侧）。

定位：颈静脉沟内，可见粗大的蓝色血管，避开气管、食管及颈部神经。

穿刺：必须在全身麻醉下操作，由熟练人员执行；选用23G针头，与颈部皮肤呈30°角进针，轻负压抽吸，见回血后固定，缓慢采血。

注意：风险较高，易损伤气管、胸膜或颈静脉，导致出血、气胸等并发症；采血过程中全程监护动物呼吸、心跳，若出现异常，立即停止采血并进行应急处理；仅在股静脉采血失败或紧急大量采血时使用。

2.3 安全采血量原则

血容量估算：约为体重的6%–7%（例：5kg猕猴，血容量约300–350mL）。

单次最大安全采血量：不超过体重×10mL/kg（即体重的1%），例：5kg猕猴，单次采血≤50mL。

短期多次采血：每周采血量不超过体重×7.5mL/kg，两次采血间隔≥3天，避免频繁采血导致动物贫血、免疫力下降。定期检测血红蛋白或血细胞比容，以监测贫血迹象。

（一）采血后立即将血液沿采血管管壁缓慢注入对应采血管，抗凝管需轻柔颠倒混匀5—8次（避免剧烈摇晃导致溶血），促凝管静置即可。

（二）立即在采血管壁上清晰标注猕猴编号、采血日期、采血时间及时送检或按要求保存。

（三）根据实验需求，进行离心分离血浆/血清（通常在采集后30分钟内离心），或进行全血分析。分离后的样品按要求（常温、4℃、-20℃或-80℃）保存。

将使用后的一次性器材（针头、注射器、棉球等）分类放入医疗废物容器，严禁随意丢弃，投入专用的锐器盒或医疗废物垃圾袋，按规定进行无害化处理。

血液样本采集不仅是一项技术操作，更是严谨的科学实践与伦理责任，整个过程必须做到事前有计划、过程有控制、事后可追溯，严守质量标准与伦理底线。

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